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    马博最新官方和数明小讲堂 | 新冠核酸检测之PCR技术

    2022-04-07

    马博最新官方和数明小讲堂 | 新(xīn)冠核酸检测(cè)之(zhī)PCR技术(shù)

     

    疫情防控

    科学(xué)防疫(yì) 马博最新官方和数明(míng)有(yǒu)

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    当前上海正处于抗新型冠状病毒肺炎疫情防控的关键阶段,在这个没(méi)有硝烟的战(zhàn)场上,及时快(kuài)速地(dì)筛查新(xīn)冠感染者并(bìng)及时进行隔离是阻止新冠病毒肆意蔓(màn)延的(de)最有(yǒu)效且(qiě)唯一的手段。核(hé)酸检测是目前筛查新冠(guàn)感染者(zhě)最精准、有效(xiào)、低成本的(de)技术方式。

     

    什(shí)么是PCR

    聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction), 简称PCR, 又(yòu)称多聚酶链式(shì)反应,是一项利用DNA双链复制的原(yuán)理,在生(shēng)物体外复制特(tè)定DNA片段的核酸(suān)合成技术。透(tòu)过这项技术,可在短时间内大量扩(kuò)增(zēng)目的基因,而不(bú)必依赖大肠杆菌或酵母菌等生物(wù)体。

     

    PCR扩增的三个基本步骤

    1变性:模板DNA经(jīng)加热至94℃左右并保持一定时间后(hòu),基于DNA半保留复制原(yuán)理(lǐ),还有(yǒu)碱基互补配对原则,即复制的(de)过程中双链DNA会解(jiě)链,由(yóu)双链(liàn)变成单(dān)链,为下轮反应做准备(bèi);

    2退(tuì)火:模板DNA经加(jiā)热变性成单链后,温度降至55℃左右(yòu),引物与(yǔ)模板DNA单链的(de)互补序列配对结合;

    3延伸:温(wēn)度(dù)再升至(zhì)72℃左右,在DNA聚合酶的作用下(xià),把游离的dNTP按照碱基(jī)互补(bǔ)配(pèi)对原则(zé)结合到单链上,形成一(yī)条(tiáo)由旧链(liàn)和新链杂(zá)合成(chéng)的(de)新的双(shuāng)链(liàn)DNA

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    PCR扩增原理:变(biàn)形-退火-延伸温度循环

     

    理(lǐ)论(lùn)上,经过上面步骤,目标DNA浓度可增加一倍(bèi)。重复(fù)循环上述过(guò)程,可获得更(gèng)多的(de)半保留(liú)复制链,而形成的新链又可成为下次循环的模板(bǎn)。每(měi)完(wán)成一个(gè)循环(huán)需24分钟, 仅需23小时就能将(jiāng)目标DNA扩增放大(dà)几百万(wàn)倍(bèi)。

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    全自动(dòng)核酸(suān)提纯及(jí)实(shí)时荧光PCR分析系统

     

    经过(guò)以上(shàng)分析,我们(men)就可以理解为什么核酸检测结果最快(kuài)能(néng)在几个小时内出结果。

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    实时荧光PCR定(dìng)量(liàng)分析       

    PCR扩增仪温(wēn)度控制指标(biāo)主要有(yǒu):温度(dù)的准确性、均匀性、以及(jí)升降温速(sù)度。

    1. 温度的准确性:是(shì)指(zhǐ)样品(pǐn)孔温度与(yǔ)设定温度的(de)一致性,它直接关系到实验(yàn)的成败(bài)。因(yīn)而对PCR扩增仪(yí)而(ér)言温度控制就(jiù)意味着产品质量。

    2. 温度的均匀性:是指样品孔间的温度差异,它关系到在不同样品孔(kǒng)进行(háng)反应结果的一致性。

    3. 升(shēng)降(jiàng)温速度:更快的(de)升降温(wēn)速度,可以有效缩短(duǎn)反应时(shí)间和(hé)可能的非特异性结合、反应的时间,从(cóng)而(ér)提高PCR反应特异(yì)性。

     

    相较于传(chuán)统的相对(duì)稳定耐用的机械式(shì),新的半导体温(wēn)控技(jì)术——TEC温度控制技术(shù)具有升降温(wēn)更快速(sù)的优(yōu)势,已经成(chéng)为PCR扩(kuò)增(zēng)仪的首选温度控(kòng)制技术。

     

    半(bàn)导(dǎo)体制冷器 (Thermo Electric Cooler,简(jiǎn)称 TEC) 是利用半导体材料的帕(pà)尔贴效应制(zhì)成的。如(rú)图下所示,帕尔帖效应是指当直流电流通过两种(zhǒng)半导体材料组(zǔ)成的电偶时,其一端吸热(rè),一(yī)端放热的(de)现象(xiàng)。TEC 包括一些 P 型和 N 型对(组),它们通过电极连在一起,并(bìng)且(qiě)夹在两个陶瓷电极之(zhī)间,当有电流从 TEC 流过时,电流产生的(de)热量会从 TEC 的 一(yī)侧传到另一侧(cè),在(zài) TEC 上产生(shēng)侧和(hé)侧(cè),这就是(shì) TEC 的加热与致冷原理 

     

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    帕尔帖效应(yīng),PN 节以及热流动示意图

     

    PCR扩增仪一般具有两(liǎng)种温控(kòng)模式(shì),即模块温控模式(Block-control)和反应管温控模式(tube-control)。管内样品的温度无法与温控模(mó)块同时达到预(yù)设温度,特别是PCR反应(yīng)中的孵育过程一般(bān)为(wéi)30秒或更短,如果采用只有模块温控模式的话(huà),反应混合物孵(fū)育的时间与程序设(shè)定的时间会有(yǒu)相当大的差(chà)距。为了达到反应管内部(bù)温度(dù)精确控制,需(xū)采用(yòng)反应(yīng)管控(kòng)制(zhì)模模式,通(tōng)过温度控制算法进行参(cān)数标(biāo)定和补偿,确保反应混合物按(àn)照程序设定的(de)时间维持预设温度。

     

    科技战,马博最新官方和数明在行动

    面对近期(qī)香港、深圳、上海等地(dì)奥密克(kè)戎的(de)快速扩散,核酸检(jiǎn)测能力在数(shù)量和速(sù)度方面都(dōu)面临(lín)着极(jí)大的(de)考(kǎo)验(yàn)。马博最新官方和数明半导体积极发(fā)挥了科技技术方(fāng)面的优势,组织技术(shù)专家研究PCR扩增(zēng)技术的优化解(jiě)决(jué)方案,以功率器件门(mén)极驱动(dòng)芯片和TEC控制器为(wéi)着力点,优先保障芯片供(gòng)应和(hé)交(jiāo)付,与客户一起助力抗疫,共(gòng)克(kè)时艰。

     

    数(shù)明半导体自研的20V-600V耐压全系列的低边(biān)、半桥(qiáo)、三(sān)相半桥等功率管门极驱动芯片(SLM2103SSLM2136等(děng))可用于驱动TEC,协助PCR扩增仪器客户快速、方便地完成系统设计(jì),在当前(qián)半导体(tǐ)供应(yīng)短缺时期,可以满足客户(hù)设计方案的快速变(biàn)更、验证与量产。

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    600V耐压(yā)半桥功(gōng)率器件驱动芯(xīn)片工作示意(yì)图(tú)

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    600V耐压三相半桥功率器(qì)件驱动芯片工作示意图

     

    马博最新官方和数明半导体的单芯片TEC控制器(qì)产品——SLM8833/8834/8835 集成了TEC驱动电(diàn)路、低(dī)温飘高精度(dù)温度误差(chà)放大器及环路补(bǔ)偿电路(lù)、温度设定与(yǔ)传感电路,采用高效的(de)单电感架构,实现更紧凑、更高的转(zhuǎn)换(huàn)效率及更低的噪声;其中(zhōng)功率级集(jí)成了超低阻抗的MOSFET,损耗更(gèng)低(dī)寿命更久;同时匹配模拟PID与数字PID两(liǎng)种温控模式,以满足客户PCR扩增仪的小型化创(chuàng)新设计需求

     

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    SLM8834 构成的 TEC 系统框图

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    模(mó)拟(nǐ)PID温控器模式 

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    数字(zì)PID温控模式

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